蔗糖合成酶测定试剂盒
产品名称: 蔗糖合成酶测定试剂盒
英文名称: Sucrose Synthetase(SS) Assay Kit
产品编号: BC0580
产品价格: 0
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
品牌商标: Solarbio
更新时间: 2024-11-01T11:07:29
使用范围: null
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蔗糖合成酶测定试剂盒产品内容:
提取液:液体30mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体4mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:1000μg/mL蔗糖溶液1mL×1支,4℃保存;
试剂三:液体3mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:液体40mL×1瓶,4℃保存;
试剂五:液体10mL×1瓶,4℃保存;
产品说明:
蔗糖是源(叶片等)光合产物向“库”器官运输的主要形态。SS(EC 2.4.1.13)催化植物体内游离果糖和葡萄糖合成蔗糖。
SS催化游离果糖与葡萄糖供体UDPG反应生成蔗糖,蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小与颜色的深浅成正比。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水
蔗糖合成酶测定试剂盒操作步骤:
一、测定样品提取:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
二、测定操作表:
按下表操作:
试剂名称(μL)
测定管
对照管
标准管
空白管
样本
30
30
蒸馏水
150
150
180
试剂一
150
试剂二
30
混匀,25℃准确水浴10min
试剂三
50
50
50
50
沸水浴中煮沸10min左右(盖紧,以防止水分散失),冷却
试剂四
700
700
700
700
试剂五
200
200
200
200
混匀,沸水浴30min,冷却后,在480nm下测定各管吸光值。标准管和测定管只要做一管。每个测定管需要设定一个对照管。
三、蔗糖合成酶测定试剂盒SS活力单位的计算:
1、 按照蛋白浓度计算
单位定义:每mg组织蛋白每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SS活性(μg/min/mg prot)={C标准管×V1×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)}÷(V1×Cpr)÷T=100×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr
2、 按照样本鲜重计算
单位定义:每g组织每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SS活性(μg/min /g鲜重)={C标准管×V1×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)}÷(W×V1÷V2