Poly(A) Polymerase (E.coli)

描述：本 E. coli Poly(A) Polymerase 为高效加 A 聚合酶， 该酶以RNA为模板在RNA的3′末端加入20~200个A碱基。 可应用于增强 mRNA 的稳定性，及 microRNA 加 A 尾，为 cDNA 合成提供 oligo-dT 引物结合位点等。该酶以单链 RNA 作为引物，ATP 作为底物进行聚合反应。 组分: 名称 100U 1000U E.coli Poly(A) Polymerase(5U/μl) 20 μl 200 μl 10×EPAP Reaction Buffer 500 μl 500 μl 10 mM ATP 100 μl 500 μl 25 mM MnCl2 500 μl 500 μl 活性定义： 在 37℃、pH7.9 的条件下，以 ATP 为底物，10 分钟内把 1 nmol 的 AMP 聚合到 RNA 上所需要的酶量定义为 1 个活 性单位（U）。 应用： ♦ RNA 3 标记 ♦ microRNA 加 A 尾，为 cDNA 合成提供 oligo-dT 引物结 合位点 ♦ 增强 RNA 稳定性 储存： -20°C 可保存 2 年。 热失活条件: 65°C 20 min 操作方法： 1. 按以下组分配制反应体系 E. coli Poly(A) Polymerase(5U/μl) 1 μl 10×EPAP Reaction Buffer 2 μl 10 mM ATP 2 μl 25 mM MnCl2 2 μl RNA 0.5~10 μg ddH2O Up to 20 μl 2. 混合均匀后，37°C 反应 1 小时。即可用于后续实验。 注：不同的实验需要加 A 的量会有所不同，可通过减少反应 时间来调整加 A 的长度，该酶在 37°C 反应 30 分钟时可加 30 个 A 碱基，1 小时可加 100 个 A 碱基。

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