Stbl2 感受态细胞 Stbl2 Chemically Competent Cell

产品规格: Stbl2 10×100μl pUC19（control vector） 10pg/μl 10μl F- mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr)recA1 endA1lon gyrA96 thi supE44 relA1λ-Δ(lac-proAB) Stbl2 菌株来源于 JM109 E. coli strain，适合克隆不稳定插入片段（正向重复序列，逆转录病 毒序列等）； mcr A 突变和 mcr BC-hsdRMS-mrr deletion 使该菌株更适于克隆甲基化的基因组序列；同时 Stbl2 也 可用于慢病毒载体的构建。 recA1 和 endA1 的突变有利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。不存在 lacIqZΔM15，不 可用于蓝、白斑筛选。High5TM 系列 Stbl2 感受态细胞经特殊工艺制作，经 pUC19 检测转化效率可达 109 cfu/μg DNA。1. Stbl2 感受态细胞放置冰中融化（或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速 插入冰中），加入目的 DNA（质粒或连接产物）并用手拨打 EP 管底轻轻混匀，冰上静置 25 分钟。 2. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。 基 因 型 简 要 说 明 操 作 说 明 3.向离心管中加入 0.9 mL 室温 S.O.C. 培养基，使用其他培养基会降低转化效率。 4. 30℃，225 rpm 复苏 90 分钟。 （当质粒中含有不稳定片段时， 30℃培养可降低错误重组的概率，若转化 control PUC19 计算转化效 率，则需 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。） 5. 5000rpm 离心一分钟收菌，留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 S.O.C. 培养基上。 6.将平板倒置放于 30℃培养箱过夜培养。 （若转化 control PUC19 计算转化效率，则需 37℃培养过夜） 1. 感受态细胞最好在冰上融化。2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。 3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。