真菌 DNA 快速提取试剂盒

Col-D0601

试剂盒应用

本试剂盒针对真菌特征开发的裂解液 DF 能够在 10 分钟内将真菌裂解，10 分钟完成真菌的提取和纯

化。提取的基因组 DNA 完整性高，适合 PCR、qPCR、酶切、克隆、Southern 杂交、文库构建等。

本试剂盒仅供研究使用，不可用于临床、食品、化妆品等领域。

使用方法

1. 真菌培养液 1-5mL，12,000rpm 离心 1 分钟，弃培养液。

或收集菌斑 100mg。

2. 加入 1mL 裂解液 DF 和 50mg 玻璃珠，涡旋震荡 5 分钟。

3. 加入 20μL β-巯基乙醇，65℃孵育 2 分钟。

4. 12,000rpm 离心 1 分钟，取上清。

5.（选做）加入 5μL RNase A（10mg/mL），室温静置 5-10 分钟。

6. 加入 0.5 倍体积无水乙醇，充分混匀，12,000rpm 离心 1 分钟。

7. 取上清加到 DNA 纯化柱中，12,000rpm 离心 30 秒，倒掉收集管中废液。

8. 向 DNA 纯化柱中加入 500μL 洗涤液 DFW1，12,000rpm 离心 1 分钟，倒掉收集管中废液。

9. 向 DNA 纯化柱中加入 500μL 洗涤液 DFW2，12,000rpm 离心 30 秒，倒掉收集管中废液。

10. 重复步骤 9 一次。

11. 12,000rpm 离心 2 分钟，倒掉收集管中废液。

12. 将吸附柱放入无 DNase 无 RNase 离心管中，加入 30-50μL 洗脱液 F，室温放置 1 分钟。

13. 12,000rpm 离心 2 分钟，得到 DNA 溶液，-80℃保存。

注意事项

1. 经常更换手套，防止 DNA 污染。

2. 使用无 DNase 无 RNase 的吸头和离心管，防止 DNA 降解。

3. 常更换吸头，防止交叉污染。

4. 动作轻柔，防止基因组 DNA 断裂。

5. 为了提高洗脱效率，可提前将洗脱液 BA 置于 65℃水浴后再使用。