本试剂盒利用抗原抗体特异性结合原理开展双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA），即通过向预先包被有CXC趋化因子配体12（CXCL12）抗体的微孔中，依次加入待测标本、标准品等试剂和辣根过氧化物酶（Horseradish peroxidase, HRP）标记的检测抗体，经过孵育和洗涤后，用底物TMB显色。TMB在HRP的催化下会变成蓝色，并在酸的作用下最终变成黄色。孵育完成后，用酶标仪在450nm波长下测定溶液吸光度值（OD值），结合标准曲线计算样品浓度。液体颜色的深浅和样品中的目的蛋白或分子含量呈正相关。

灵敏度：10 pg/mL

特异性：本试剂盒仅识别人组织标本中的CXCL12，与其他类似蛋白或分子无明显交叉反应。

样品收集及保存方法

1. 血清：使用血清分离管收集全血标本，室温（约25 ℃）放置2小时或4 ℃冰箱放置过夜， 3000转离心10分钟或1000 g离心20分钟，取上清立即检测，或将上清置于-20 ℃或-80 ℃冰箱保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：用EDTA或肝素抗凝管采集血液标本，在4 ℃条件下3000转离心20分钟或1000 g离心15分钟，取上清立即检测，或将上清置于-20 ℃或-80 ℃冰箱保存，但应避免反复冻融。

3. 组织匀浆：使用预冷的PBS（pH=7.0-7.4）溶液洗涤组织，尽量洗去残存血液（裂解的红细胞会影响测量结果准确性），称重后将组织剪碎，按1:9的质量体积比（即1 g组织加入9 mL溶液）加入PBS溶液（建议加入适量蛋白酶抑制剂），采用玻璃匀浆器充分研磨。后将匀浆液转入离心管中，5000 g离心10分钟，取上清立即检测，或将上清置于-20 ℃或-80 ℃冰箱保存，但应避免反复冻融。

4. 细胞培养上清：吸取细胞培养液，1000 g离心20分钟，取上清立即检测，或将上清置于-20 ℃或-80 ℃冰箱保存，但应避免反复冻融。

5. 其他标本：视具体情况确定，腹腔积液、胸腔积液和关节积液等的收集和存储方法同细胞培养上清。

6. 样品外观：样品在液态时应澄清透明，处理时应尽量通过离心去除悬浮物和漂浮物。

7. 样品保存：样本收集后如在一周内检测，可置于4 ℃保存；若不能及时检测，请按一次使用量进行小份分装，置于-20 ℃（1个月内检测）或-80 ℃（半年内检测）保存，避免反复冻融。