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流式细胞技术部分:
流式细胞技术是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量和定量分析的新型分析技术和分选技术,能快速定量测定悬浮液中单细胞所发出的散射光和荧光的技术。一般每秒可测达5000个细胞,且具有高度的重复性。它对特殊分子定量测定,精确统计,能进行多参数相互的相关数据分析。鉴定细胞亚型,具有较高的灵敏度及测定速度。目前已广泛应用于免疫学,生物化学,生物学,肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。
其特点:
1 测量速度,最快可在1秒钟内计数万个细胞;
2 可进行多参数测量,可以对同一个细胞做相关物理、化学特性的多参数测量,并具有明显的统计学意义;
3 是一门综合性的高科技的方法,它综合了激光技术、计算机技术、流体力学、细胞化学、图像技术等多领域的知识和成果。
4 既是细胞分析技术,也是精确的分选技术。
工作原理:让荧光染色的细胞在稳定的液流推动装置作用下通过直径为50-100um的小孔并排列成单行,每个细胞依次而且恒速通过激光束的照射区,细胞受激光照射后产生散射光和荧光。通过检测散射光可知细胞的体积,检测荧光可知细胞DNA或RNA的含量。根据所规定的参量可把指定的细胞亚群从整个群体中分选出来,以便进一步的研究分析。
直方图(Histogram Plot)
流式细胞术应用:
1) 细胞大小,分选
2) 细胞的颗粒度
3) 细胞表面分子:CD 系列
4) 细胞浆内分子:胞内细胞因子
5) 细胞核内分子:DNA、 RNA 含量及P53
6) 细胞功能检测:细胞周期、凋亡
7) 白血病免疫分型
8) HLA-B27: 强直性脊柱炎
9) 淋巴细胞亚群
10) 造血干细胞计数:造血干细胞移植
11) 网织红细胞
12) PNH诊断(CD55、CD59)
13) 血小板活化试验