链霉亲和素磁珠(1μm)

中文名称：链霉亲和素磁珠(1μm)
英文名称：1μm Streptavidin Magnetic beads
产品规格：1ml|10ml|100ml
本制品采用独特的蛋白偶联技术将链霉亲和素共价连接于固相载体表面，可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。本产品采用超顺磁性微球，粒径均一、形貌规整，有利于方便、快捷地捕获目标分子以及实现磁性分离。本产品可配套自动化设备进行高通量操作。

链霉亲和素-生物素（SA-Biotin）系统具有极高的结合亲和力（Kd=10^-15），在生物领域具有广泛的应用。

主要参数：
粒径：1μm
结合能力：
 ·游离生物素：1100pmol/mg磁珠
 ·生物素化单链寡核苷酸(24nt)：500pmol/mg磁珠
 ·生物素化IgG：20μg/mg磁珠
磁珠浓度：10mg/mL
磁珠表面：亲水基团
贮存液：1×PBS，含0.1%（w/v）BSA，0.1%（v/v）proclin-300
保存：2～8℃，有效期2年。

产品应用：
·蛋白提取分离纯化；
·免疫检测；
·细胞分选；
·核酸提取分离纯化；
·核酸探针制备；
·DNA-蛋白质相互作用研究。

使用前准备：
1．缓冲液：以下为常用的缓冲液成分，用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH
2．Buffer I（适用于结合生物素化核酸）：10mM Tris-HCl（pH7.5），1mM EDTA，1M NaCl，0.01%~0.1% Tween-20
3．Buffer II（适用于结合生物素化抗体/蛋白）：PBS，pH7.4，含0.05% Tween-20，可根据需要添加0.01%~0.1% BSA
4．化学发光Washing buffer：用户根据需求配制洗液，使用时平衡至室温
5．磁性分离器
6．漩涡振荡器
7．旋转混合仪
8．移液器及吸头
9．合适的离心管

操作流程：

一、结合生物素化核酸
1．将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100μL磁珠到新的离心管中。将离心管置于磁性分离器上，静置1min（此操作后续简称为磁性分离），用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。
  注意：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品信息表中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍，使磁珠饱和。
2．加入1mL Buffer I到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。
备注：当步骤1取用磁珠体积大于1mL时，加入与磁珠体积相同的Buffer I。
3．重复“步骤2”一次。
4．加入500μL的用Buffer I稀释的生物素化核酸（使磁珠浓度为2mg/mL），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合30min。
5．磁性分离，将上清液转移至新的离心管。
6．按“步骤2”的方法洗涤磁珠三次。
7．根据后续实验的要求，加入合适的低盐缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化核酸步骤完成。磁珠可用于后续操作。
8．用户可以通过测定反应前后核酸的浓度，计算结合到磁珠上的核酸量[（反应前浓度-反应后浓度）×反应溶液体积]。

二、结合生物素化抗体/蛋白操作流程
1．将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100μL磁珠到新的离心管中。磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。
  注意：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品信息表中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍，使磁珠饱和。
2．加入1mL Buffer II到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。
  注意：当步骤1取用磁珠体积大于1mL时，加入与磁珠体积相同的Buffer II。
3．重复“步骤2”两次，共洗涤三次。
4．加入1mL用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白（使磁珠浓度为1mg/mL），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合60min。
5．磁性分离，将上清液转移至新的离心管。
6．按“步骤2”的方法洗涤磁珠五次。
7．根据后续实验的要求，加入Buffer II或其他合适的缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化抗体/蛋白步骤完成。磁珠可用于后续操作。

三、磁微粒化学发光免疫诊断操作流程
1．调整磁珠至合适浓度（建议0.8mg/ml），将磁珠置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取50μL磁珠至96孔板中，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。
2．每孔加入100μL生物素化捕获抗体，充分震荡重悬磁珠，37℃恒温箱中孵育15min后，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。
3．每孔加入200μL的Washing buffer，充分震荡重悬磁珠，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板，该步骤再重复2次，共洗涤3次。
4．每孔加入50μL待测物标准品或待测样本，充分震荡重悬磁珠，37℃恒温箱中孵育15min后，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。
5．每孔加入200μL的Washing buffer，充分震荡重悬磁珠，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板，该步骤再重复2次，共洗涤3次。
6．每孔加入100μL酶标记抗体，充分震荡重悬磁珠，37℃恒温箱中孵育15min后，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。
7．每孔加入200μL的Washing buffer，充分震荡重悬磁珠，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板，该步骤再重复2次，共洗涤3次。
8．每孔加入150μL的底物液，充分震荡重悬磁珠，避光孵育5min。
9．将96孔板放入化学发光仪读数，并进行相应数据处理。

注意事项：
1．应避免对磁珠进行冷冻等操作。
2．为减少磁珠损失，每次磁性分离的时间应不少于1min。
3．从磁珠保存管中移取磁珠前应充分震荡重悬均匀。操作过程中应避免产生气泡。
4．建议使用质量好的移液器吸头和反应管，避免因粘附磁珠及溶液而造成损失。
5．生物素化分子的大小会影响磁珠的载量。用户需要根据实验确定磁珠对特定生物素化分子的载量。
6．生物素化分子的加入量应为磁珠载量的1~2倍，以使磁珠饱和。
7．如需生物素与SA磁珠分离，可采用：
  方法一：0.1% SDS，煮沸5min；
  方法二：pH=8.2，含95%甲酰胺的10mM EDTA中，65℃ 5min或90℃ 2min。脱落率95%。
8．本产品仅供研究使用。 

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！