SunBio Trans-EZ siRNA转染试剂适用于绝大多数原代培养细胞和转化细胞株的siRNA转染，以抑制内源性基因或外源性基因的表达。在最佳实验条件下，转染后细胞的存活率高达90%以上，转染效率高于其他类型的转染试剂。特点：1.转染效率高； 2.细胞毒性低；3.生物稳定性高；4.适用范围广泛；5.不受有无血清及抗生素的影响；6. 操作简单，无需更换培养基。
该转染试剂可用于下面的稳定细胞系或原代细胞，通过目的报告基因，如 EGFP，Luciferase或者内源性基因表现：
例如Hela-EGFP, A549-EGFP, C6-EGFP, B16F0-EGFP, CHO-K1-EGFP, HT1080-EGFP, HeLa-Luc, CHO-K1-Luc, HT1080-Luc, PC-3M-Luc-C6, NIH-3T3, NRK-49F,原代肝脏星状细胞等等. 　　

SunBio Trans-EZ siRNA转染试剂在Hela-EGFP细胞中对于报告基因EGFP的反转染过程 (Example #1)

一：细胞的准备
    将Hela-EGFP细胞种到96孔板中，使用含有10%小牛血清的DMEM培养基培养，密度为1～1.5x10⁴个细胞/100微升/孔，过夜培养, 转染实验中细胞融合度达到80～90%。

二：试剂的准备
    SunBio^TM转染试剂(5mg/ml备用液)与 siRNA (0.25mg/ml, 相当于 20mM)在Opti-MEM中分别以 2/1, 4/1, 8/1, 16/1 (w/w)的比率准备好，用于转染效率实验。

三：板的规格：转染实验于96孔板中进行(三倍孔实验).

	Blank/未处理	只加siEGFP (0.25 µg /孔)
SunBio/siEGFP (w/w): 2/ 1	SunBio/siEGFP (w/w): 4 / 1	SunBio/siEGFP (w/w): 8 / 1	SunBio/siEGFP (w/w): 16 / 1

注：siEGFP即针对EGFP的siRNA.

四：用SunBio 转染试剂制备siEGFP混合物
    在96孔板中，siEGFP的用量按0.25微克/孔计算配制混合物用于转染实验。
    siEGFP 组, siEGFP 用量为 4 ml；Opti-MEM 用量为26 ml。

表一

siEGFP (0.25 µg/µl)	Opti-MEM	SunBio转染试剂 (5 µg/µl) / siEGFP (0.25 µg/孔) 比率
		2 / 1		4 / 1		8 / 1		16 / 1
		SunBio	Opti	SunBio	Opti	SunBio	Opti	SunBio	Opti
1.0µl × 3	6.5µl × 3	0.1µl× 3	7.4µl × 3	0.2µl × 3	7.3µl × 3	0.4µl × 3	7.1µl × 3	0.8µl × 3	6.7µl × 3
4.0µl (×4)	26.0µl (×4)	0.4µl (×4)	29.6µl (×4)	0.8µl (×4)	29.2µl (×4)	1.6µl (×4)	28.4µl (×4)	3.2µl (×4)	26.8µl (×4)

注：表中所提到的比率均为重量比（w/w）
这四种比率， 总的 siEGFP 用量为 4.0ml x 4 = 16ml; 总的Opti-MEM 用量为 26.0ml x 4 = 104 ml.

五：每25ul的 siRNA 和转染试剂混合到一起，在RT中孵化15分钟，每种混合物中各取15ul 加到指定的板中。

六： SunBio 转染试剂辅助siEGFP所得的 knockdown 效率，在转染后 48小时通过荧光显微镜即可观察。（siRNA anti-luciferase 实验在 luciferase稳定的细胞系中和在 EGFP 稳定的细胞系中是相似的.）

SunBioTrans-EZ siRNA转染试剂在Hela细胞中对内源性基因的转染流程 (Example #2)
SunBio转染试剂在Hela细胞中，辅助siRNA对内源性基因laminA/C的knockdown作用.

一：细胞准备
    Hela细胞使用含有10%小牛血清的DMEM培养基，以3×10⁵/2毫升/孔的密度种在6孔板里，过夜培养, 在转染实验时细胞的融合度达到 80～90%。

二：试剂准备
    SunBio转染试剂(5mg/ml备用液)与 siRNA (0.25mg/ml, 相当于 20mM)在Opti-MEM中分别以 2/1, 4/1 (w/w)的比率准备好，用于转染效率实验。

三：板的规格：6孔板, siEGFP的用量按5.625微克/孔计算配制混合物用于转染实验.

Blank/空白	SunBio 转染试剂/siEGFP (2/1): 5.625mg
SunBio转染试剂/siLamin A/C (2/1): 5.625mg	SunBio 转染试剂/siLamin A/C (4/1): 5.625mg

siLamin A/C即针对Lamin A/C的siRNA; siEGFP即针对EGFP的siRNA, 在本实验中作为非相关siRNA对照.

四：使用SunBio转染试剂准备siRNA-Lamin A/C混合溶液 siRNA-Lamin A/C的用量为5.625mg/孔，与SunBio试剂按不同比例配制混合物用于转染实验.

五：每110ml silaminA/C和转染试剂混合后，在RT中反应15min, 每种混合物中各取200ul加入到指定的孔板中。

六：SunBio 转染试剂辅助siLamin A/C 所得的 knockdown 效率， 转染后48小时后通过RT-PCR即可观察。

SunBio Trans-EZ siRNA 转染试剂

产品规格： 5 mg/ml

产品包装： 1 ml/支

试剂保存： 4℃保存，请勿冷冻

图片资料

在Hela-EGFP 细胞中，SunBio Trans-EZ siRNA 转染试剂 siegfp 的转染效果 

在 PC-3M-Luc-C6 细胞中 SunBio Trans-EZ siRNA 转染试剂对 siLuciferase 的转染效果