产品内容：
提取液：30mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体8mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体8 mL×1瓶，4℃保存；
试剂三：液体80mL×1瓶，4℃保存；
标准品：液体1mL×1支，20μmol/mL丙酮酸钠标准品，4℃保存。
产品说明：
GPT（EC 2.6.1.2）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化氨基酸和酮酸转氨基反应，在氨基酸代谢中具有重要作用。此外，哺乳动物肝细胞GPT活性很高，当肝细胞坏死，GPT释放到血液中，血清GPT活性显著增高。因此，GPT被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。
GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应，生成丙酮酸和谷氨酸；加入2,4-二**苯肼溶液，不仅终止上述反应，而且与酮酸中的羰基加成，生成丙酮酸苯腙；苯腙在碱性条件下呈红棕色，可以在505nm读取吸光值并计算酶活力。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品测定的准备
1、细胞或微生物样品的制备：
先收集细胞或微生物样品到离心管内，弃上清，按照每500万细胞或微生物加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）。3500g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：
称取约0.1g组织，加入1mL提取液进冰浴行匀浆。3500g  4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定操作表：
1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至505nm，蒸馏水调零。
2、 标准曲线的测定
首先将标准品稀释至2μmol/mL，按下表混合标准品和试剂一得到浓度梯度标准管：
 
标准品（μL）
试剂一（μL）
标准管浓度（μmol/mL）
90
30
1.5
60
60
1
45
75
0.8
36
84
0.6
24
96
0.4
12
108
0.2
6
114
0.1
3
117
0.05
0
120
0
3、 在EP管中加入下列试剂
试剂名称（μL）
测定管
对照管
标准管
待测样本
20
 
 
试剂一
100
100
 
标准液
 
 
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