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实验原理:
BW-NFC402条件恐惧(FCS)用于小型啮齿类动物(大、小鼠)环境相关条件恐惧实验研究。啮齿类动物在恐惧时会表现出特有的不动状态(immobility),动物在这种情况下倾向于保持静止不动的防御姿势。抗抑郁药和抗中枢兴奋药可以明显缩短不动状态持续的时间,所以常常用于焦虑、抑郁领域研究,也可以用于恐惧消退等的研究。
实验过程中,实验对象被给与一个声音信号(条件刺激),随后给予电击(非条件)刺激。该训练称为条件训练,训练结束后实验动物进行声音信号或环境联系实验。一般情况下啮齿类动物对相应的环境和不同环境下同样的声音信号都会做出明显的条件恐惧反应,如静止不动。这种测试可以在训练结束后立刻或几天后进行可以提供在条件信号影响下短期和长期记忆的信息。
实验步骤:
实验分为三个阶段:
第一阶段:条件训练(1天)
无刺激 180s
声音信号 30s
电击 2s
无刺激 20s
第一阶段为训练实验,实验动物被给与条件声音刺激。
第二阶段:环境相关(2天)
无刺激 180s
第二阶段将实验动物放入第一阶段中的环境中以期评价环境相关的条件恐惧程度。
第三阶段:改变的环境相关信息(2天+2h)
无刺激 180s
声音 180s
无刺激 60s
改变环境信息(比如在实验箱中放入一个分隔板、改变光源和背景噪音或用其他溶液清洗实验箱等)后观察动物的条件恐惧程度。刺激的顺序由实验者决定。
实验结束后通过软件系统对记录的数据进行分析。
以上的实验中,第二阶段没有给与任何刺激但是实验动物表现出明显的环境相关恐惧。在第三阶段,同一只动物在改变了环境后没有表现出任何不动反应(活动减少),但是在给与声音信号后,可以观察到明显地条件恐惧反应。
实验硬件:
1 实验箱组件:
由铝合金、医用有机玻璃制成,方便拆卸更换,无毒无味,外观美观坚固耐用。实验环境由场景集控器控制,集控器集成了通风扇、蜂鸣器、LED白光灯和红外灯等,安装于实验箱顶盖上,用来提供实验所需的环境及条件刺激信号。
2 条件控制器:用于人工控制声音发生、光源、电刺激等
3 电击器:条件恐惧电击器(与金属栅栏相连),另一端与控制器相连。装有电击模块的微处理器提供持续的电流刺激,通过软件可调刺激电流。
记录的参数:
1) Freezing相关:实验时间、freezing总次数、每次freezing时间点、每次freezing持续时间、freezing总时间、freezing时间占总时间的百分比、
2) 活动度相关:总实验时间、总活动距离(cm)、总平均速度(cm/s)、每个阶段的时间、距离及平均速度