One-Step Real-Time RT-PCR Kit
产品名称: One-Step Real-Time RT-PCR Kit
英文名称: One-Step Real-Time RT-PCR Kit
产品编号: PR-M20
产品价格: 0
产品产地: 上海
品牌商标: majorbio
更新时间: null
使用范围: null
- 联系人 :
- 地址 : 上海市浦东新区国际医学园区康新公路3399弄3号楼
- 邮编 : 201203
- 所在区域 : 上海
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- 邮箱 : marketing@majorbio.com
本产品为一步法荧光RT-PCR,即将RT、PCR反应操作在同一管中连续进行。反应过程中不需添加任何操作,从而避免了样品间的相互污染。试剂盒主要由两部分组成:RT-PCR Mix和Enzyme Mix。RT-PCR Mix为优化过的dNTP、PCR buffer、MgCl2及稳定剂等的2倍浓度混合物,Enzyme Mix为反转录酶和热启动Taq酶组成的混合物。用户只需加入适量的引物、探针和待检样品即可进行荧光定量PCR反应。
本试剂盒适用于各种动物、植物、病毒RNA进行荧光定量PCR检测。本系统操作简便、灵敏度高、特异性好、无污染,适用于各种荧光定量PCR仪。
【规格】
20 人份(50ul 体系)
【试剂盒组成】
组分名称 |
体 积 |
1.RT-PCR Mix |
500 ul |
2.Enzyme Mix |
40 ul |
3.DEPC-ddH2O |
1ml |
【储存条件】
【保质期】
一年
【反应液配制】
反应液组份 |
加入量 (μl) |
推荐终浓度 |
RT-PCR Mix |
25 |
1× |
Enzyme Mix |
2 |
— |
Forward primer (10uM) |
1 |
200 nM |
Reverse primer (10uM) |
1 |
200 nM |
Taqman 探针(10uM) |
1 |
200 nM |
RNA样品或对照 |
10pg ~100ng |
- |
DEPC-ddH2O |
up to 50ul |
- |
注:(1)通常引物终浓度为200nM效果最佳,但当反应性能较差时可根据需要在100-600nM范围内调整引物浓度。
(2)探针终浓度可根据具体使用要求在100-400nM范围内进行调整。
(3)建议使用103-106 copies病毒RNA或10pg~100ng总RNA为模板。
【扩增条件】
① 42℃ 30min
② 95℃ 2min
③
60℃ 40s
注:Detector和 Quencher根据荧光探针标记物类型选定,用户可根据引物设计的具体情况相应调整退火温度、退火时间和循环数。
【注意事项】
1.本产品仅供科研使用。
2. 试剂盒中组分使用前应充分融化并混匀。
3.反应体系配制、样本处理及加样、PCR扩增及检测应分区进行避免污染。
4.实验所用器具、耗材均经RNase-free处理。
5.禁止对荧光PCR专用反应管做任何标记,避免外源性荧光信号干扰。
6.避免PCR反应管中试剂带有气泡,否则会产生非特异的荧光信号。
7.试剂盒请在保质期内使用,避免反复冻融。