One-Step Real-Time RT-PCR Kit-PCR/RT-PCR/qPCR-试剂-生物在线
上海美吉生物医药科技有限公司
One-Step Real-Time RT-PCR Kit

One-Step Real-Time RT-PCR Kit

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产品名称: One-Step Real-Time RT-PCR Kit

英文名称: One-Step Real-Time RT-PCR Kit

产品编号: PR-M20

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产品产地: 上海

品牌商标: majorbio

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使用范围: null

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本产品为一步法荧光RT-PCR,即将RTPCR反应操作在同一管中连续进行。反应过程中不需添加任何操作,从而避免了样品间的相互污染。试剂盒主要由两部分组成:RT-PCR MixEnzyme MixRT-PCR Mix为优化过的dNTPPCR bufferMgCl2及稳定剂等的2倍浓度混合物,Enzyme Mix为反转录酶和热启动Taq酶组成的混合物。用户只需加入适量的引物、探针和待检样品即可进行荧光定量PCR反应。

本试剂盒适用于各种动物、植物、病毒RNA进行荧光定量PCR检测。本系统操作简便、灵敏度高、特异性好、无污染,适用于各种荧光定量PCR

 

【规格】

20 人份(50ul 体系)

【试剂盒组成】

组分名称

体 积

1RT-PCR Mix

500 ul

2Enzyme Mix

40 ul

3DEPC-ddH2O

1ml

【储存条件】

-20保存,避免反复冻融

【保质期】

一年

【反应液配制】

反应液组份

加入量 (μl)

推荐终浓度

RT-PCR Mix

25

1×

Enzyme Mix

2

Forward primer (10uM)

1

200 nM

Reverse primer (10uM)

1

200 nM

Taqman 探针(10uM)

1

200 nM

RNA样品或对照

10pg ~100ng

­

DEPC-ddH2O

up to 50ul

:1)通常引物终浓度为200nM效果最佳,但当反应性能较差时可根据需要在100-600nM范围内调整引物浓度。

2)探针终浓度可根据具体使用要求在100-400nM范围内进行调整。

3)建议使用103-106 copies病毒RNA10pg100ngRNA为模板。

【扩增条件】

  42    30min

  95    2min

 94    10s

    60    40s

注:Detector Quencher根据荧光探针标记物类型选定,用户可根据引物设计的具体情况相应调整退火温度、退火时间和循环数。

【注意事项】

1.本产品仅供科研使用。

2. 试剂盒中组分使用前应充分融化并混匀。

3反应体系配制、样本处理及加样、PCR扩增及检测应分区进行避免污染。

4.实验所用器具、耗材均经RNase-free处理。

5.禁止对荧光PCR专用反应管做任何标记,避免外源性荧光信号干扰。

6.避免PCR反应管中试剂带有气泡,否则会产生非特异的荧光信号。

7.试剂盒请在保质期内使用,避免反复冻融。