定量PCR Real-time qPCR就是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。由于Real-time qPCR的众多优点，现在已经是生命科学领域的一项重要技术，并成为基因表达差异和文章发表不可或缺的部分。real-time qPCR输出的数据不同于常规PCR电泳检测，很多没有做过real-time qPCR的研究者常常感到高深莫测，不知从何入手；甚至一些做过一些实验的研究者也会对数据处理分析感到迷惑。很多时候，尽管知晓qPCR的原理和基本操作，仍然浪费时间和精力，而得不到好的结果或对大量的数据不知所措。 信诺金达的real-time qPCR技术服务，根据实验目的，设计实验方案（相对定量或绝对定量；SYBR Green I或Taqman探针方法），用完全按照符合国际标准（MIQE）的real-time qPCR试剂完成实验，提供符合文章发表的客观事实实验报告和原始数据。 服务要求 需提供新鲜或保存完好的细胞（至少5×106）、组织(至少50mg)、血液(300μl)等样本材料；或纯化好的总RNA（OD260/OD280在1.9-2.1之间，完整性好）或总DNA（OD260/OD280在1.7-1.9之间，完整性好）；或反转录好的cDNA不少于30μl（反转录的总RNA完整性好，纯度在1.9-2.1之间）； 同时提供待测基因序列或登录号。 报告内容 总RNA(或DNA)浓度，电泳图片，扩增曲线，熔解曲线，Ct值以及数据统计分析（可选），实验报告以及剩余引物和模板（方舟生物可保存1个月） 实验报告部分组成 服务编号 服务项目 内容说明 价格 周期 相对定量SYBR Green I染料法 基础费用 引物合成，扩增效率 ￥1000/基因 2-3周※ SGSQP01 样品检测费用 检测样品数＜10 ￥200/样品•基因 SGSQP02 10≤检测样品数≤20 ￥160/样品•基因 SGSQP03 检测样品数＞20 ￥120/样品•基因 3-4周※ 相对定量探针法 基础费用 包含一条探针合成和标准曲线 ￥2600/基因 4-5周※ SGSQP04 样品检测费用 检测样品数＜10 ￥200/样品•基因 SGSQP05 10≤检测样品数≤20 ￥160/样品•基因 SGSQP06 检测样品数＞20 ￥120/样品•基因 绝对定量探针法 基础费用 标准品，标准曲线，和一条探针合成 ￥3500/基因 4-5周※ SGSQP07 样品检测费用 检测样品数＜10 ￥200/样品•基因 SGSQP08 10≤检测样品数≤20 ￥160/样品•基因 SGSQP09 检测样品数＞20 ￥120/样品•基因 绝对定量SYBR GreenI法 基础费用 标准品，标准曲线 ￥2000/基因 3-4周※ SGSQP10 样品检测费用 检测样品数＜10 ￥200/样品•基因 SGSQP11 10≤检测样品数≤20 ￥160/样品•基因 SGSQP12 检测样品数＞20 ￥120/样品•基因 miRNA SYBR Green I 相对定量 基础费用 引物合成，扩增效率 ￥1200/miRNA 3-4周※ SGSQP13 样品检测费用 检测样品数＜10 ￥300/样品•基因 SGSQP14 检测样品数≥20 ￥200/样品•基因 SGSQP15 引物设计合成 设计引物，≤30碱基，2OD，PAGE级纯化 ￥4/碱基 1周 SGSQP16 定量PCR标准品构建 目的序列扩增，连接到载体，质粒拷贝数确定 ￥1000/基因 1-2周 定量PCR价格里不包括样品制备费用，如需cDNA，DNA制备，费用另计。 ※：一般情况下，3周左右可完成实验！若遇特殊原因，比如实验材料降解，需要重新提供样品或者总RNA需要重新提取；基因表达量较低，需要构建标准品等情况，周期会有所延长。