selleck产品在文献中的引用: 
    
   
Proc Natl Acad Sci   USA, 2013, 110(52):E5039-48
  
  
   
J Mol Cell Cardiol, 2013, 67C:49-59
  
  
   
Development, 2013, 10.1242/dev.103341
  
  
   
Cell Rep, 2013, 5(4):1010-21
  
  
   
University of Maryland, , University of   Maryland
  

客户使用selleck产品的实验数据：
  更多详情请访问中国唯一官方网站www.selleck.cn/products/Y-27632.html         
生物活性
产品描述
Y-27632 2HCl是一种选择性的ROCK1(p160ROCK)抑制剂，Ki为140 nM，比对其他激酶包括PKC，cAMP依赖性蛋白激酶， MLCK和PAK的作用强200多倍。
靶点
ROCK1
ROCK2
 
 
 
 
IC50
140 nM (Ki) [1]
300 nM (Ki) [6]
 
 
 
 
体外研究
Y-27632也同等有效抑制ROCK-II。Y-27632作用于PKC, cAMP依赖的蛋白激酶和 肌球蛋白轻链激酶(MLCK)几乎没有活性，Ki分别为26 μM, 25 μM, 和 > 250 μM。Y-27632通过选择性抑制Ca2+敏感化，而抑制多种兴奋剂而不是KCl，包括Phenylephrine, Histamine, Acetylcholine, Serotonin, Endothelin,和Thromboxane诱导的平滑肌收缩，IC50为0.3-1 μM。Y-27632 作用于培养的细胞，抑制Rho诱导的, p160ROCK调节的应力纤维的形成。[1]Y-27632处理，阻断 Rho调节的肌动球蛋白的激活，也阻断LPA刺激的MM1 细胞入侵活性，这种作用存在浓度依赖性。[2] 10 μM Y-27632 处理在无血清悬浮(SFEB)培养基中的人类胚胎干细胞(hES)，显著减少分离诱导的凋亡，提高克隆效率(从~1%提高到~27%), 转基因后促进亚克隆,且使SFEB培养的hES细胞存活及分化成Bf1+皮质和基底端脑祖细胞。[5]
体内研究
Y-27632按30 mg/kg剂量口服处理自发性高血压大鼠，肾性高血压大鼠，及去氧皮质酮醋酸(DOCA)盐高血压大鼠，显著降低血压，这种作用存在剂量依赖性。[1]Y-27632按每小时0.55 μL通过植入泵持续处理表达Val14-RhoA的大鼠，持续11天，延迟 MM1 细胞入侵。[2] Y-27632作用于肺循环，通过抑制ROCK, 降低 缺氧诱导的血管生成，和血管重构。[4]
特征
 
推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)
激酶实验: [1]
磷酸化反应
在COS 细胞中表达的p160ROCK 作为标记的全长蛋白，使用抗标签抗体进行免疫沉淀反应。在不同浓度Y-27632存在时，p160ROCK (30 ng) 和40 μM [γ-32P]ATP(3.3 Ci/mmol)及3 μg组蛋白(HF2A), 去磷酸化的酪蛋白或 MBP在30oC下温育，总体积为31 μL。分别在0, 5, 10, 和 20 分钟采集 7 μL等分样，与等体积2 × Laemmli样本缓冲液混合，然后进行SDS-PAGE。使用考马斯亮蓝对凝胶进行染色，烘干，然后通过Bioimage Analyzer BAS2000分析。获得抑制50%p160ROCK活性所需的Y-27632浓度(IC50值)。
动物实验: [1]
动物模型
携带自发或诱发高血压的雄性Wistar大鼠
配制
溶于DMSO,然后在盐水中稀释
剂量
30 mg/kg/day
给药处理
口服处理
溶解度
Saline, 30 mg/mL
参考文献
[1] Uehata M, et al. Nature, 1997, 389(6654), 990-994.
[2] Itoh K, et al. Nat Med, 1999, 5(2), 221-225.
[3] Bito H, et al. Neuron, 2000, 26(2), 431-441.
[4] Watanabe K, et al. Nat Biotechnol, 2007, 25(6), 681-686.
[5] Hyvelin JM, et al. Circ Res, 2005, 97(2), 185-191.
[6] Ishizaki T, et al. Mol Pharmacol. 2000, 57(5), 976-983.