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北京兰博泰斯生物科技有限公司
Western Blot检测服务

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产品名称: Western Blot检测服务

英文名称: Western Blot

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WB蛋白质印迹(Western Blot),其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
一、样本制备                          
1. 悬浮细胞:取大约 1×107个细胞,低速离心收集,弃去培养液,加入1ml PBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入-70℃ 冰箱保存。
2. 贴壁细胞:取大约1×107个贴壁细胞,胰酶消化后加入PBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入-70℃ 冰箱保存。
3. 组织:采集新鲜组织(注意:生物体死亡后10分钟内取材料并保存好),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,切为小块,放入-70℃冰箱中保存。
样本量:组织样本,质量大于100mg;细胞样本,细胞数大于1×106;
二、蛋白质抽提                
实验对象为组织样品,取适量(250~500mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂),匀浆后抽提总蛋白(或核蛋白)。 实验对象为细胞样品(细胞培养),每份样品取1×106~1×107细胞,PBS清洗细胞,去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂)抽提总蛋白(或核蛋白)。