Wehelp 2×Eva Mixture
产品名称: Wehelp 2×Eva Mixture
英文名称: Wehelp 2×Eva Mixture
产品编号: Molebio-006
产品价格: 0
产品产地: 中国
品牌商标: wehelp
更新时间: null
使用范围: null
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Wehelp (Golden)Eva Mixture是专用于染料法(Eva Green)实时荧光定量 PCR的预混体系,浓度为2×,包含(Golden)Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、Eva Green荧光染料和Mg2+。配制好的预混合液操作简单便捷、能有效缩短操作时间,减少移液过程中混入的污染。
Eva Green染料是一种核苷酸荧光染料,有较好的热稳定性与水解特性,更加便利地用于各种扩增,包括qPCR、熔解曲线分析、高分辨率熔解曲线分析(HRM)、常规溶液的DNA量化及毛细管电泳等,适用于各种仪器设备。与SYBR Green Ӏ 能快速通过细胞膜提高突变性不同的是,Eva Green染料不能穿透细胞膜,因此不具突变性与细胞毒性。
Molebio-006中使用了全新高效的Taq DNA Polymerase与Wehelp独特配制的PCR缓冲体系,Taq DNA Polymerase具有5’-3’聚合酶活性和3’-5’外切酶活性,PCR反应能灵敏度高、特异性强。
Eva Green优势(与SYBR Green Ӏ 相比)
Ø 能有效抑制非特异性扩增。
Ø 采用更高浓度的染料,荧光信号更强。
Ø 高浓度的Eva Green能有效减少PCR反应末端常见的染料重新分布问题,熔解曲线分析更加精确。
Ø 优化qPCR反应和熔解曲线分析,产量高、重复性好。
Ø 适用于荧光定量PCR检测,能够准确地对目的基因进行定量和检测。
注意事项
Ø -20℃避光保存,避免污染。
Ø 避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。Ø 使用前,需上下轻轻颠倒混匀,防止染
料吸附在瓶壁上,经短暂离心后使用。
Ø 在荧光定量PCR仪上进行实时PCR,并在退火或延伸步骤记录荧光信号。
Ø 本产品未添加ROX校正染料。
Ø 本产品不能用于探针法荧光定量PCR。
PCR反应体系
试剂 |
50 μl 反应体系 |
终浓度 |
2× Golden Eva Mixture |
25 μl |
1× |
10 μM Forward Primer |
1 μl |
0.2 μM (0.05-1 μM) |
10 μM Reverse Primer |
1 μl |
0.2 μM (0.05-1 μM) |
Template DNA |
2 μl |
|
ddH2O |
to 50 μl |
|
PCR循环反应条件
步骤 |
循环次数 |
温度 |
时间 |
1 |
1 |
96℃ |
2分 |
2 |
35~40 |
95℃ |
15 秒 |
60~64℃ (信号采集点) |
1分 |
||
3 |
1 (熔解曲线) |
95℃ |
15秒 |
60℃ |
1分 |
||
95℃ |
15秒 |
||
60℃ |
15秒 |