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【知识点】CHO细胞和杂交瘤细胞表达工艺对比

作者:北京同立海源生物科技有限公司 暂无发布时间 (访问量:9954)

大众对于生物药的认识可能依然模糊,不过从治疗癌症的靶向药物,到控制糖尿病的胰岛素,再到预防流感的疫苗,这些生物药已经融入了普通人的生活。不同于化学药,生物药是利用组织、细胞、体液等活体组织获得的。在这个过程中,细胞表达系统扮演着关键的角色。它们就像微型的工厂,能够生产出我们需要的药物。而在所有的细胞表达系统中,中国仓鼠卵巢(CHO)细胞和杂交瘤细胞无疑是最为重要的两种。

 

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CHO细胞的表达工艺

CHO细胞的表达工艺始于基因的引入。科研人员首先设计并合成了包含目标蛋白质编码序列的质粒DNA,然后通过转染技术将其引入CHO细胞中。一旦DNA进入细胞,它就会被细胞的机器读取,并开始生产目标蛋白质。接下来是细胞的培养,CHO细胞在特定的培养基中生长,这种培养基为细胞提供了生长所需的所有营养物质。在适当的条件下,CHO细胞可以快速繁殖,从而大量生产目标蛋白质。最后是蛋白质的提取,当细胞生长到一定程度时,科研人员会收集培养液,并通过一系列的纯化步骤提取出目标蛋白质。这些步骤包括离心、过滤、色谱等,目的是将目标蛋白质从其他细胞成分中分离出来。

 

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CHO细胞的优势:

CHO细胞的优势在于其生长速度快、易于操作和遗传稳定性好。首先,CHO细胞的生长速度快,使得它们能够在短时间内大量繁殖,从而提高蛋白质的生产效率。其次,CHO细胞易于操作,可以通过常规的转染技术引入目标基因,而且可以在常规的培养基中生长,这大大简化了实验操作。最后,CHO细胞的遗传稳定性好,意味着一旦基因被引入,它们就能稳定地表达目标蛋白质,而不会发生基因丢失或表达量下降的情况。

 

CHO细胞的劣势:

然而,CHO细胞也有其劣势。首先,由于CHO细胞是哺乳动物细胞,它们有可能被病毒污染,这对于药物生产来说是一个重大的安全隐患。其次,虽然CHO细胞能够进行蛋白质的糖基化修饰,但其糖基化模式与人类不完全相同,这可能影响到药物的效果和安全性。

 

杂交瘤的表达工艺

 

与CHO细胞相比,杂交瘤的表达工艺更为复杂。首先,科研人员需要将B淋巴细胞和肿瘤细胞融合在一起,形成杂交瘤细胞。这个过程需要在特定的条件下进行,包括适当的温度、pH和电场。接下来是克隆的选择。由于不是所有的融合细胞都能够稳定地生产抗体,科研人员需要通过筛选来选择出能够持续生产高质量抗体的克隆。最后是抗体的提取。和CHO细胞一样,科研人员需要收集培养液,并通过一系列的纯化步骤提取出抗体。这些步骤可能包括离心、过滤、色谱等,目的是将抗体从其他细胞成分中分离出来。

 

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杂交瘤的优势:

杂交瘤的主要优势在于它们能够产生高特异性的单克隆抗体。这些抗体具有高度的特异性和亲和力,能够精确地识别并结合到目标分子上。这使得它们在诊断和治疗各种疾病,特别是癌症时,具有极高的价值。此外,杂交瘤细胞具有无限增殖的能力,这意味着一旦得到一个高质量的克隆,就可以无限制地生产出一致的抗体。

 

杂交瘤的劣势:

然而,杂交瘤也有其劣势。首先,细胞融合的效率通常较低,这意味着需要大量的细胞才能得到足够数量的杂交瘤细胞。其次,克隆选择的过程既耗时又耗力,因为需要筛选出能够稳定地生产高质量抗体的克隆。最后,由于杂交瘤细胞是由两种不同的细胞融合而成的,它们的遗传稳定性可能不如CHO细胞。

 

应用选择

在产品后期应用中,CHO细胞和杂交瘤细胞各有所长。由于CHO细胞的生物相容性和生产能力特点,它们被广泛用于生产治疗各种疾病的生物药物,如抗体药物、疫苗和生长因子等。而杂交瘤细胞则主要用于生产用于研究和诊断的单克隆抗体。这些抗体可以用来识别和测量体内的特定分子,从而帮助我们了解疾病的发生和发展。

 

总的来说,无论是CHO细胞还是杂交瘤细胞,它们都在生物制药中发挥着重要的作用。虽然它们各有优势和劣势,但正是因为这些特性使得它们在不同的应用中各显神通。例如,当我们需要大量生产复杂的蛋白质药物时,CHO细胞可能是最佳选择。而当我们需要生产高特异性的单克隆抗体时,杂交瘤细胞可能更为合适。然而,无论我们选择哪种细胞表达系统,都需要不断地优化和改进。这可能包括改进培养条件、优化转染方法、提高纯化效率等。此外,随着基因编辑技术的发展,我们现在有了更多的工具来改变细胞的性质,从而提高它们的生产能力。在未来,随着科技的进步和我们对这些系统理解的深入,我们期待看到更多的创新和优化,以进一步提高生物药物的生产效率和质量。无论是CHO细胞还是杂交瘤细胞,它们都将继续在生物制药中发挥着重要的角色,帮助我们开发出更有效、更安全的药物,以改善人类的健康和生活质量。

 

北京同立海源生物建有符合cGMP标准万级洁净实验室,拥有10余年真核/原核表达、生产经验,公司生产的GMP级单克隆抗体、重组蛋白已覆盖生命科学研究领域、体外诊断领域以及药物开发领域。另外,公司特色定制化服务还可以根据客户需求制备所需蛋白(抗体),并为客户提供生产工艺优化、中式生产、蛋白纯化、内毒素去除以及制剂生产等技术服务。

 

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关于同立海源

北京同立海源生物科技有限公司,成立于2011年,专注细胞和基因治疗(CGT)上游GMP级原料试剂研发,致力于为生命科学提供可靠的产品与服务。产品涉及细胞分选磁珠试剂,真核/原核重组蛋白、无血清培养基、细胞培养试剂盒、转染试剂、基因编辑工具酶等。为细胞和基因治疗药物、抗体药物开发、细胞储存等生物制药和IVD领域提供核心原料试剂与服务。

北京同立海源生物科技有限公司的全资子公司北京景达医疗器械有限公司建有2000的研发实验室及GMP级洁净车间,包括真核与原核蛋白表达工程平台、细胞培养技术开发平台、体外诊断试剂生产平台,通过ISO13485和ISO9001双认证,部分产品已获美国FDA DMF备案。

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