链脲佐菌素(STZ)是诱发一型糖尿病模型最常见的的化学药物。STZ药物能特异性损伤胰岛β细胞有关细胞器的膜结构,导致酶扩散和酶活性的改变,进而影响β细胞的结构和功能,使胰岛素分泌明显减少,导致高血糖。从分子水平上其毒性作用首先是将DNA碱基上的特殊位点烷基化,再进一步作用于ADP核糖体合成酶,从而损伤胰岛β细胞,导致高血糖,诱发糖尿病。STZ复制的模型动物在临床症状、生化指标等方面与人类糖尿病相似,因而对人类了解一型糖尿病的病因、发病机制、病理特征以及指导糖尿病的防治工作起重要作用。
建模方法:
大鼠禁食12小时,连续三天腹腔注射链脲佐菌素STZ(55 mg/kg,溶于0.1 M柠檬酸盐缓冲液,pH 4.4-4.5,4℃)。72小时后,检测大鼠空腹血糖( FBG )浓度大于或等于16.7 mmoL/L即模型建立成功。Con组进行连续三天腹腔注射0.1 M柠檬酸盐缓冲液。
检测方法和结果:
机械痛测定方法(Ascending测试法)
1.将试验动物放置在机械痛金属网架上静置30 min-1 h,待动物不再张望、探究、较安静后开始测试;
2.试验动物安静后用Von-Frey纤维丝缓慢轻柔的刺激待测后肢足底使纤维丝弯曲,持续2-3s观察动物缩足反应。按照纤维丝克数从小到大的顺序逐一刺激受试动物,每一个克数的纤维丝连续刺激5次,每次刺激间隔至少10s。若出现的阳性反应小于3次,则使用较大一级的纤维丝重复上述操作,当测试第一次出现3次或3次以上的阳性反应,则该纤维丝为该动物的疼痛阈值(每只动物测2次测试,取其平均值)。
3.动物若由于刺激而出现抬足、躲避或舔足动作反应,则标记为阳性(×),由于身体活动而引起的缩足反应则不算在内;若没有上述表现,则标记为阴性(О)。
4.纤维丝克数:Mouse(g): 0.16、0.40、0.60、1.0、1.4、2.0切断值为2.0g;Rat(g): 0.60、1.0、1.4、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、15.0切断值为15.0g。
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