弗氏完全佐剂是一种油包水的乳浊液,能够非常有效的诱导产生高滴度的抗体。弗氏完全佐剂含结核分枝杆菌的细胞壁成分,可以加强对抗原的抗体反应。佐剂活性来自于油滴中免疫原的持续释放,并刺激局部免疫反应。
完全弗氏佐剂(CFA)是一种常用的致炎剂。完全弗氏佐剂(CFA)被广泛应用于脚掌皮肤、踝关节炎症痛等慢性疼痛模型的制作。
完全弗氏佐剂 (CFA) 可诱导细胞介导的免疫,并作为免疫增强剂增强免疫球蛋白的产生。CFA 诱导的这些反应导致注射部位的组织炎症和细胞因子的释放。
建模方法:
用微量进样器抽取20μL完全弗氏佐剂(CFA)溶液,从小鼠一侧后爪足趾部位进针,将完全弗氏佐剂(CFA)溶液缓慢注射至小鼠掌心皮下位置,在皮下形成皮丘;停针20s缓慢旋转出针,避免液体渗出。
检测方法和结果
机械痛测定方法(Ascending测试法)
1.将试验动物放置在机械痛金属网架上静置30 min-1 h,待动物不再张望、探究、较安静后开始测试;
2.试验动物安静后用Von-Frey纤维丝缓慢轻柔的刺激待测后肢足底使纤维丝弯曲,持续2-3s观察动物缩足反应。按照纤维丝克数从小到大的顺序逐一刺激受试动物,每一个克数的纤维丝连续刺激5次,每次刺激间隔至少10s。若出现的阳性反应小于3次,则使用较大一级的纤维丝重复上述操作,当测试第一次出现3次或3次以上的阳性反应,则该纤维丝为该动物的疼痛阈值(每只动物测2次测试,取其平均值)。
3.动物若由于刺激而出现抬足、躲避或舔足动作反应,则标记为阳性(×),由于身体活动而引起的缩足反应则不算在内;若没有上述表现,则标记为阴性(О)。
纤维丝克数:Mouse(g): 0.16、0.40、0.60、1.0、1.4、2.0切断值为2.0g;Rat(g): 0.60、1.0、1.4、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、15.0切断值为15.0g。
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