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百萤—钙黄绿素橙钠盐光谱及实验方案

作者:西安百萤生物科技有限公司 2023-06-13T00:00 (访问量:3244)

 钙黄绿素橙钠盐是美国AAT Bioquest生产的用于细胞活力测定的试剂,Calcein AM 是流行的荧光探针之一,用于标记和监测活细胞的细胞功能。百萤生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供优质的钙黄绿素橙钠盐。

光谱:

 

实验方案;

使用细胞活力指标AM酯类

        AM酯是非极性酯,其易于穿过活细胞膜,并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针加载到活细胞中。 但是,使用AM酯时必须小心,因为它们易于水解,特别是在溶液中。 它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜(DMSO)。 DMSO储备溶液可以在20℃下干燥储存并避光。 在这些条件下,AM酯应稳定数月。

 以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。 

a)在高质量无水DMSO中制备2至5mM AM酯的储备溶液。非离子洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加AM酯的水溶性。

注意:在稀释到上样缓冲液中之前,可将等体积的20%Pluronic®F-127溶液添加到细胞活力指示剂的DMSO储备溶液中。终的Pluronic®F-127浓度约为0.02%。

注意:不建议在Pluronic®F-127存在下长期储存AM酯。

b)在实验当天,要么将细胞活力的固体指示剂溶解在DMSO中,要么将等分的指示剂储备溶液解冻至室温。在您选择的缓冲液(如Hanks和Hepes缓冲液)中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系,建议终浓度范围为4至5μM的细胞活力指标。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。

c)如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白,可以在细胞培养基中加入丙磺舒(1-2.5 mM)或磺吡酮(0.1-0.25 mM),以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37℃下将细胞与AM酯孵育20分钟至1小时。

d)在不含细胞活力指示剂的缓冲液(含有阴离子转运蛋白抑制剂,如果适用)中洗涤细胞以除去过量的探针。

注意:通过流式细胞术立即分析细胞样品,以确定在零时间没有洗涤的每个细胞的平均荧光。

e)在所需的Ex / Em波长下进行实验 。

1所示。与钙黄绿素的形象活海拉细胞染色橙色™钠盐(# 22008)和钙黄绿素二乙酸橙™(# 22009)。钙黄绿素橙色™钠盐不能渗透完整活细胞

 

参考文献:

Functional imaging of neuronal activity of auditory cortex by using Cal-520 in anesthetized and awake mice
Authors: Jingcheng Li, Jianxiong Zhang, Meng Wang, Junxia Pan, Xiaowei Chen, Xiang Liao
Journal: Biomedical Optics Express (2017): 2599--2610

NINJ2--A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Jingjing Wang, Jingjing Fa, Pengyun Wang, Xinzhen Jia, Huixin Peng, Jing Chen, Yifan Wang, Chenhui Wang, Qiuyun Chen, Xin Tu
Journal: Cellular Signalling (2017)

Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
Authors: Peixi Liu, Yingjie Zhou, Qingzhu An, Yaying Song, Xi Chen, Guo-Yuan Yang, Wei Zhu
Journal: MEDICINE (2016): 1--8

Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
Authors: Anja Lena Thiebes, Manuel Armin Reddemann, Johannes Palmer, Reinhold Kneer, Stefan Jockenhoevel, Christian Gabriel Cornelissen
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322--331

Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)

Inhibition of ABC transport proteins by oil sands process affected water
Authors: Hattan A Alharbi, David MV Saunders, Ahmed Al-Mousa, Jane Alcorn, Alberto S Pereira, Jonathan W Martin, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 81--88

Rapid generation of collagen-based microtissues to study cell--matrix interactions
Authors: Marie-Elena Brett, Alexandra L Crampton, David K Wood
Journal: Technology (2016): 1--8

Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
Authors: Hattan A Alharbi, Jane Alcorn, Ahmed Al-Mousa, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)

Spraying respiratory epithelial cells to coat tissue-engineered constructs
Authors: Anja Lena Thiebes, Stefanie Albers, Christian Klopsch, Stefan Jockenhoevel, Christian G Cornelissen
Journal: BioResearch open access (2015): 278--287

The efficient hemostatic effect of Antarctic krill chitosan is related to its hydration property
Authors: Shuai Wu, Zhuoyao Huang, Jianhui Yue, Di Liu, Ting Wang, Pierre Ezanno, Changshun Ruan, Xiaoli Zhao, William W Lu, Haobo Pan
Journal: Carbohydrate polymers (2015): 295--303

 

 

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