细胞培养血清的作用及分类
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血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能.
细胞培养血清的作用
1.在细胞培养中提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物.
2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力.
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用.
4.在细胞培养中是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源.
5.起酸碱度缓冲液作用.
6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,在细胞培养中保护细胞不受伤害.
血清的类别:
胎牛血清、透析型胎牛血清 、天然低IGG胎牛血清 、干细胞培养胎牛血清 、特殊用途胎牛血清 、活性炭/葡萄糖处理胎牛血清 、胎牛血清替代物 、小牛血清 、新生牛血清 、加强型小牛血清 、补铁小牛血清 、成牛血清 、供体马血清 、兔血清 、鸡血清 、猪血清 、马血清 、其他动物血清 、合成血清替代品。
血清的常见问题
保存血清最好的方法?
血清应保存在-5C至-2OC。然而,若存放于4C时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。 [5]
如何解冻血清才不会使产品质量受损?
将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8C冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。[5]
如何避免沉淀物的产生?
1、解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2O。C至4。C至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20。C至37。C),实验显示非常容易产生沉淀物。
2、解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生
3、请勿将血清置于37。C太久。若在37。C放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
5、若必须做血清的热灭活,请遵守56。C,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
6、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?
欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。