Decosterd和Woolf在2000年介绍了持续性神经病理性疼痛的动物模型即坐骨神经分支选择损伤(spared nerve injury,SNI)模型。他们结扎坐骨神经的3个终末分支中的2根(胫神经和腓总神经),发现有持续性疼痛存在,表现为大鼠周期性自发性地后肢退缩动作,另外大鼠对机械性刺激痛觉过敏.但是热痛阈改变不明显。
模型建立:
1.手术器械消毒,结扎线消毒;
2.小鼠麻醉后,小鼠一侧后肢剃毛,消毒;
3.剪开皮肤,分离筋膜;钝性分离大腿中部肌肉,使坐骨神经分支腓总神经、腓肠神经 、胫神经暴露于视野中;
4.用玻璃分针挑起腓总神经和胫神经进行结扎,在远心端将腓总神经和胫神经剪断并截断1-2mm(5-0线),不损伤腓肠神经;
5.结束后后对肌肉和皮肤进行逐层缝合,消毒。
检测方法和结果:
机械痛测定方法(Ascending测试法)
1.将试验动物放置在机械痛金属网架上静置30 min-1 h,待动物不再张望、探究、较安静后开始测试;
2.试验动物安静后用Von-Frey纤维丝缓慢轻柔的刺激待测后肢足底使纤维丝弯曲,持续2-3s观察动物缩足反应。按照纤维丝克数从小到大的顺序逐一刺激受试动物,每一个克数的纤维丝连续刺激5次,每次刺激间隔至少10s。若出现的阳性反应小于3次,则使用较大一级的纤维丝重复上述操作,当测试第一次出现3次或3次以上的阳性反应,则该纤维丝为该动物的疼痛阈值(每只动物测2次测试,取其平均值)。
3.动物若由于刺激而出现抬足、躲避或舔足动作反应,则标记为阳性(×),由于身体活动而引起的缩足反应则不算在内;若没有上述表现,则标记为阴性(О)。
4.纤维丝克数:Mouse(g): 0.16、0.40、0.60、1.0、1.4、2.0切断值为2.0g;Rat(g): 0.60、1.0、1.4、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、15.0切断值为15.0g。
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