描述
Thermo Scientific Pierce Gaussia 荧光素酶闪光检测试剂盒为研究人员提供了高度灵敏的测定,用于检测哺乳动物细胞培养基和全细胞裂解物中调节元素的转录活性。
Gaussia荧光素酶闪光检测试剂盒的特点:
•灵敏—高 1000 倍的灵敏度允许使用较小数量的细胞
• 具有成本效益—高度灵敏的测定减少了试剂消耗
• 分泌荧光素酶—在不破坏细胞的前提下支持实时测定和动力学研究
• 节省时间— 采用分泌荧光素酶进行测定只需要极少的样品处理
• 适合自动化—适合用于高通量筛选
• 便利—包含一种通用的细胞裂解缓冲液和经过优化的闪光型测定试剂
• 安全—允许用户执行非放射性测定
该闪光检测试剂盒包含的试剂用于测定哺乳动物细胞培养基和裂解物中 Gaussia 荧光素酶的活性。当与 Thermo Scientific Gaussia Luc 载体一起使用时,该试剂盒提供了一个非常灵敏的生物发光报告基因测定系统,用于对启动子或通路活性进行分泌或细胞内检测。Gaussia 荧光素酶在细胞培养基中高度分泌,可对报告基因活性进行活细胞监测。Gaussia 所产生的信号要比在类似条件下测定的萤火虫或海肾荧光素酶的信号高得多。
包括:
细胞裂解缓冲液、反应缓冲液和底物
需要:
Gaussia 荧光素酶和光度计或其他能够监测发光的仪器(如 Thermo Scientific Luminoskan Ascent 和 Varioskan 闪光酶标仪)。
应用:
• 用于分析顺式调节元素和反式作用因子的启动子研究
• 药物筛选
• siRNA 和 miRNA 筛选
• 研究脱靶效应的多通路测定
• 分泌通路/蛋白定位报告基因测定
• 信号转导通路分析
• RNA 剪接研究
Gaussia 荧光素酶是来自海洋桡脚类动物 Gaussia princeps 的 20kDa 蛋白。生物发光酶在细胞培养基中高度分泌,可对报告基因活性进行活细胞监测。荧光素酶反应产生的光输出可与生成的 Gaussia 荧光素酶蛋白的量相关,并可用于测定驱动 Gaussia 表达的启动子的活性。Gaussia 荧光素酶所产生的信号表现出很强的闪光动力学特征,并且比在类似条件下测定的萤火虫或海肾荧光素酶的信号高得多。该检测试剂盒针对与 Gaussia Luc 载体搭配使用进行了优化,但与其他使用腔肠素作为底物的 Gaussia 荧光素酶和衍生物完全兼容。(对于辉光检测,使用我们的 Gaussia-Dura Luc 载体。)