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Peptide Hydrogel Suitable for 3D Cell Culture——3D多肽水凝胶完美超越基质胶(matrigel)

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2017-02-28T00:00 (访问量:5598)

 Peptide Hydrogel Suitable for 3D Cell Culture

——3D多肽水凝胶完美超越基质胶(matrigel

Yeasen多肽水凝胶产品是由一种由16个氨基酸组成的多肽,在盐离子存在情况下自发组装成的水凝胶支架结构。多肽的大小通常在5nm左右,是亲水性和疏水性氨基酸残基交替排列组成的两性分子肽段,能形成折叠片结构,并自组装形成纳米纤维,这些纳米纤维相互交织在一起形成基质并进一步形成含水量超过99.5%的水凝胶支架(见图1)。

Yeasen多肽水凝胶无需通过调节聚合物和交联剂的量来获得不同类型的水凝胶。组分单一,受环境影响小,针对不同类型细胞配有不同类型水凝胶产品,可直接进行挑选使用。

1:图示为两性多肽通过自组装形成水凝胶的过程。

3D多肽水凝胶的特点:

还原体内外坏境,给细胞更真实的感觉——Yeasen水凝胶系列产品在适当条件下,可自组装成平均孔径为50~200nm的纤维状结构,形成与天然细胞外基质(ECM)相似的网状立体结构,能够为细胞的粘附、迁移、增殖和分化提供更接近体内的外环境。

组分明确,无动物异源蛋白和病原体——Yeasen水凝胶系列产品是一种人工合成的多肽类生物纳米材料,由1%w/v)的合成多肽及99%的水组成,无需通过肿瘤分离,能有效避免因动物异源蛋白和病原体污染造成的细胞生长抑制等其他不利影响。

操作简单,观察方便——可以直接用荧光染料和免疫试剂对培养在3D水凝胶中的细胞的进行标记,Yeasen水凝胶产品外观呈透明状,可用共聚焦显微镜或其它显像技术获得清晰的细胞形态图像。Yeasen多肽水凝胶4度保存,可室温操作。

3D细胞培养水凝胶功能:

1)适合大多数种类细胞的培养。

2)促进细胞的分化,例如,肝前体细胞、大鼠PC12细胞、心肌细胞、海马神经元细胞及内皮细胞等;

3)增强原代细胞贴壁能力,如神经元细胞、成纤维细胞及角化细胞等;

4)增强转染细胞系的贴壁能力,如MG-63SH-SY5YHEK-293NIH3T3等。

3D细胞培养水凝胶(Hydrogel)与基质胶(Matrigel)对比

 

3D细胞培养水凝胶(Hydrogel

基质胶(Matrigel

生产方式

人工合成

EHS小鼠肿瘤中分离

主要成分

1%w/v)的合成多肽+99%的水

主要成分由层粘连蛋白,型胶原,巢蛋白,硫酸肝素糖蛋白等,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等

外观

透明

淡黄色到深红色(含酚红)

批次差异性

稳定

批次浓度差异性大

储存

2-8℃

-20℃,使用时需要过夜融化

运输

冰袋

干冰

适用实验类型

促进增殖和分化;促进原代细胞贴壁和增殖;支持转染细胞的增长;干细胞增殖,肿瘤细胞迁移/侵袭

细胞生长、分化,形态研究,细胞化学功能,细胞迁移/侵袭,细胞基因/蛋白表达,裸鼠成瘤

使用浓度

0.1%-1%

根据实验目的稀释(1:3或原液)

操作注意事项

室温;避免引入盐离子,用无菌蔗糖或去离子水稀释

严格低温:实验涉及的液体、耗材需提前预冷

【注】如用于血管生成实验,请购买高浓度基质胶(货号:354248

简便的操作流程:

1)水凝胶原液水浴超声(或涡旋振荡)30 min,离心去除气泡;

2)用20%无菌蔗糖稀释超声后的水凝胶至需要的浓度;

3)消化收集细胞,离心去除培养基;

4)用10%无菌蔗糖重悬细胞至需要的浓度;

5)取等体积(1:1)稀释的水凝胶和细胞悬液迅速混匀;

6)迅速(2 min内)将上述水凝胶和细胞混合物转移至细胞培养板等;

7)缓慢加入细胞培养基,30 min内更换2次培养基;

830~60 min即可成胶。

实例展示:

1)用于成人骨髓间充质干细胞的培养Cat No. 40134ES

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