1992年,Kim和Chung报道了SNL模型,方法是结扎大鼠的L5、L6脊神经或单独结扎L5脊神经,动物的机械性痛觉过敏症状明显,该模型的优点是损伤神经和未损伤神经的脊髓节段完全分开,有利于对比研究初级传入纤维是否或如何参与疼痛的发生机制
建模方法:
1.实验动物麻醉后俯卧位放置在手术台上,腰椎髋骨处剪毛备皮并消毒;
2.碘伏消毒后,沿脊柱在髋骨附近开一2cm左右的开口,分离筋膜和肌肉,暴露L5横突;
3.镊子小心咬断L5横突,暴露L5神经;
4.玻璃分针分离L5神经并使用5-0结扎线进行神经结扎;
5.缝合肌肉和皮肤,消毒。
检测方法和结果:
机械痛测定方法(Ascending测试法)
1.将试验动物放置在机械痛金属网架上静置30 min-1 h,待动物不再张望、探究、较安静后开始测试;
2.试验动物安静后用Von-Frey纤维丝缓慢轻柔的刺激待测后肢足底使纤维丝弯曲,持续2-3s观察动物缩足反应。按照纤维丝克数从小到大的顺序逐一刺激受试动物,每一个克数的纤维丝连续刺激5次,每次刺激间隔至少10s。若出现的阳性反应小于3次,则使用较大一级的纤维丝重复上述操作,当测试第一次出现3次或3次以上的阳性反应,则该纤维丝为该动物的疼痛阈值(每只动物测2次测试,取其平均值)。
3.动物若由于刺激而出现抬足、躲避或舔足动作反应,则标记为阳性(×),由于身体活动而引起的缩足反应则不算在内;若没有上述表现,则标记为阴性(О)。
4.纤维丝克数:Mouse(g): 0.16、0.40、0.60、1.0、1.4、2.0切断值为2.0g;Rat(g): 0.60、1.0、1.4、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、15.0切断值为15.0g。
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