免疫系统调节人体的各种生理过程。因此,提高机体免疫力,增强免疫功能,对于预防疾病的发生,恢复健康至关重要。活化的巨噬细胞可直接或间接参与免疫系统的免疫反应,通过吞噬作用清除抗原异物、衰老细胞和细胞碎片,进而分泌活性氧、活性氮和促炎因子。
巨噬细胞(Macrophages)属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。小鼠巨噬细胞样细胞系RAW264.7是医学研究中最常用的小鼠巨噬细胞细胞系,RAW264.7细胞株是约30年前从生长在BAB/14小鼠体内的肿瘤中获得的,这是一种BALB/c IgH同源株,接种了Abelson小鼠白血病病毒(MuLV)。
巨噬细胞的形态会随着细胞活性、功能、环境和药物的改变而改变。例如,相关研究显示一种低分子量肽(NJP)处理引起RAW264.7细胞形态学改变,胞体增大呈圆形和不规则形状,伪足扩张,而正常对照组巨噬细胞呈圆形,形态正常。很多实验者发现在RAW264.7细胞正常培养中,细胞也会出现多边形和不规则形状,并伴有许多伪足的生成,细胞贴壁能力超强。
据了解,实验者甚至用0.25%的胰酶消化30min,结果细胞仍“无动于衷”。
经过本公司技术员不断探究,
总结出了关于RAW264.7细胞培养的若干注意事项,
希望可以帮到大家。
培养注意事项
1. 该细胞传代时不需要用胰酶消化。传代时,吸走部分培养液,留下少许培养液(如T25培养瓶留下7-8ml),用无菌细胞刮刮拭培养表面将细胞刮落,吹打后接种到新的装有新鲜培养液的培养瓶内。
2. 该株巨噬细胞形态上包含松散贴壁的纺锤形和圆形或者立方形的细胞。当细胞密度较大时,细胞会轻微脱落变圆或者许多细胞堆在一起,有些细胞甚至脱落漂浮,这些漂浮的细胞是存活的,在传代时应收集起来离心,细胞沉淀可以继续培养。
3. 血清质量差异可能引起细胞贴壁能力变化,应选用高质量的胎牛血清。
4. 培养条件、运输、环境变化等因素会影响此细胞的状态,因此收到细胞后需要调整一段时间,请耐心培养。
5. 强烈推荐使用本公司对应的培养基,减少细胞培养过程的变因。
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