【小福支招】单抗融合不成功,融合效率低,融合后半死不活,八成是支原体污染!
支原体污染是细胞培养的一大杀手,做单抗每天都要与细胞打交道,难免不收支原体的*扰,有时候即使是老司机也不一定容易被发现。支原体污染潜在来源:一是血清;二是细胞;三是环境;四是操作。如果不是环境(包括培养箱)中有大量支原体的话,都是比较好处理。我们再培养SP2/0的时候,由于其长势较快,轻微的污染不容易被看到,但是融合的细胞比较娇嫩,往往会阻遏融合细胞生长,细胞融合yiciliangci 不成功效率低,我们往往最容易想到的是试剂和操作的污染,我们把所有的东西都换了一遍,融合仍然没有改善;怎么办?
细胞支原体污染的判别方法,一般用支原体PCR扩增检测方法,当然也可以用环等温快速检测试剂盒,但是由于支原体分型较多,市面上的试剂盒质量参差不齐,有时候对于轻度污染并不一定能很好的检出。因此,在发现细胞碎片增多,长势不好,细胞周末有铁壁的类似煎鸡蛋样附着物在细胞贴壁附近的时候,可以怀疑支原体污染,建议买一支杂交细胞支原体清除试剂(货号:MAC0020)按照说明书方法,使用支原体试剂处理细胞,如果处理后细胞状态有明显改善的话,再连续培养一段时间,支原体基本可以被完全清除掉。