1、购买细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少的情形?

研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。

2、有必要做热灭活吗?

实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。

3、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?

血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。

4、细胞培养时能否更换胎牛血清?

首先要确定更换胎牛血清的理由，如果细胞培养无异常的话，不建议随意更换不同品牌和来源的胎牛血清。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的来源(血源地)和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同地域和等级的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞死亡。

如果是使用的胎牛血清出现了问题，比如保存不当或操作不当导致血清成分析出、混浊、污染等情况，可以优先更换同品牌、等级、批次的血清;如果是产品质量问题更换血清品牌的话，需要用一批细胞进行预实验才行，以保证细胞能够正常培养。

另外在购买胎牛血清的时候要选择正规来源和经过海关检疫胎牛血清，非正规来源的胎牛血清有很多安全隐患，对实验室、操作人员、细胞培养、实验数据都有很大的影响。

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5、培养细胞什么时候需要换液?

视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。

6、培养基到底要不要加抗生素?

除于特殊筛选系统中外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。如果是没有进行过细胞培养的新手，对无菌技术没有信心的，或者提取的原代细胞，怕污染的，可以适量添加抗生素。抗生素本身也是有毒性的，有些抗生素的药效浓度水平与毒效浓度水平非常接近，对细胞多少有伤害

7、培养基里的粉红色是什么?

酚红一般作为培养基中pH值的指标：当培养基呈中性时为红色，呈酸性时为黄色，碱性时为紫色。另外，酚红可以模拟类固醇激素(特别是雌激素)的作用。如果要避免类固醇反应，可以在无酚红的培养基里进行培养

8、如何避免细胞培养过程中的污染?

主要还是考虑无菌环境，尽量做好操作台的灭菌，别把培养基滴落在生物安全柜的入风口，别在培养箱里把培养基打翻。这两个地方霉菌一旦滋生，那你就只能等着用甲醛熏蒸了。

紫外无法杀灭霉菌，酒精也不行，只能用甲醛熏蒸，但是一定要注意安全。复苏的时候，水浴锅也需要进行灭菌处理。一旦出现污染，不要急，能救的就用抗生素救一下，但是一般情况下，选择扔掉。避免交叉感染，要不只能整个实验室消毒了。

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上海中乔新舟生物科技有限公司

1、原代细胞：人脐静脉内皮细胞、人脐带间充质干细胞、人脂肪间充质干细胞、iPS诱导多能干细胞（可提供细胞流式及免疫荧光鉴定报告，需签订MTA协议）。

2、培养基：原代细胞专用低血清、无血清、无异源蛋白无动物成分培养基。

3、细胞培养试剂：胎牛血清、原代细胞转染试剂盒、细胞实验检测试剂盒、细胞生长因子、ELISA试剂盒、定量PCR芯片试剂盒、DNA/RNA及细胞裂解物等。

4、细胞系（株）：种类丰富，已通过STR鉴定；提供细胞株完全培养基。

5、自研产品：支原体检测/清除试剂盒、端粒酶检测试剂盒、人源/动物源ELISA试剂盒等系列产品。

6、技术服务：细胞荧光标记服务（GFP/RFP/LUC）、干扰/过表达稳转株构建、细胞基因敲除、细胞系鉴定服务（STR）、原代细胞永生化、肿瘤细胞耐药株构建、原代细胞分离等。